لیبارٹری کرومیٹوگرافک کالموں کے بارے میں جانیں

کرومیٹوگرافک کالمعلیحدگی کی تکنیک مکسچر میں مقررہ مرحلے اور موبائل مرحلے کے مابین مختلف پارٹیشن گتانک پر مبنی ہے۔ اسٹیشنری مرحلہ عام طور پر ایک اشتہاربینٹ ہوتا ہے ، جیسے سلکا جیل ، ایلومینا ، پولیمائڈ ، وغیرہ ، جو یکساں طور پر کرومیٹوگرافک کالم میں بھرا ہوا ہے۔ موبائل مرحلہ سالوینٹ ہے جو مرکب کو کرومیٹوگرافک کالم میں لاتا ہے ، جسے ایلوینٹ بھی کہا جاتا ہے۔ جب کرومیٹوگرافک کالم میں موبائل مرحلہ چلتا ہے تو ، ہر جزو مختلف وقت کے لئے فکسڈ مرحلے پر رہتا ہے جس کی وجہ سے پارٹیشن گتانک کے فرق کی وجہ سے ، علیحدگی حاصل کی جاسکتی ہے۔

ایک اہم علیحدگی کے آلے کے طور پر ، لیبارٹری کرومیٹوگرافک کالم کیمیائی ، حیاتیاتی ، دواسازی اور دیگر شعبوں میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔ کرومیٹوگرافی کے اصول کی بنیاد پر ، مکسچر میں ہر جزو کی علیحدگی کو پارٹیشن گتانک ، جذب کی صلاحیت اور فکسڈ مرحلے اور موبائل مرحلے کے مابین مختلف مادوں کی گھلنشیلتا کے فرق کا استعمال کرکے موثر انداز میں محسوس کیا جاسکتا ہے۔ یہ مقالہ لیبارٹری کرومیٹوگرافک کالم کے مختلف شعبوں میں بنیادی اصول ، قسم ، انتخاب کا طریقہ ، آپریشن کے طریقہ کار اور اطلاق کو تفصیل سے متعارف کرائے گا۔

لیبارٹری کرومیٹوگرافک کالموں کو ان کے عمل کے اصول ، مواد ، شکل اور سائز کو بھرنے کے اصول کے مطابق کئی اقسام میں تقسیم کیا جاسکتا ہے۔

action عمل کے اصول کے مطابق درجہ بندی

1) اشتہارپشن کالم کرومیٹوگرافی: مرکب کے ہر جزو کی جذب صلاحیت میں فرق کو الگ کرنے کے لئے ایڈسوربینٹ کا استعمال کیا جاتا ہے۔ اڈسوربینٹ کا انتخاب اس مادہ کی نوعیت پر منحصر ہوتا ہے جو الگ ہوجاتے ہیں ، جیسے سلیکا جیل غیر قطبی اور قطبی مرکبات کی علیحدگی کے لئے موزوں ہے ، اور ایلومینا تیزاب اور الکالی کے مطابق مختلف قسم کے مرکبات کے لئے موزوں ہے۔

2) پارٹیشن کالم کرومیٹوگرافی: مقررہ اور موبائل مراحل کے مابین پارٹیشن گتانک میں فرق کے مطابق مرکب الگ کیا جاتا ہے۔ پارٹیشن کالم کرومیٹوگرافی عام طور پر موبائل مرحلے کے طور پر سالوینٹ سسٹم کا استعمال کرتی ہے اور سالوینٹ کی تشکیل کو تبدیل کرکے پارٹیشن گتانک کو ایڈجسٹ کرتی ہے۔

3) آئن ایکسچینج کالم کرومیٹوگرافی: مرکب میں آئنوں کی انتخابی جذب اور رہائی کو آئن ایکسچینج رال کے ذریعہ الگ کیا گیا ہے۔ آئن ایکسچینج رال میں مخصوص آئن ایکسچینج گروپس ہوتے ہیں جو الگ الگ مادہ میں آئنوں کا تبادلہ کرسکتے ہیں۔

material مواد کو بھرنے سے ترتیب دیں

1) سلکا جیل کالم: سلکا جیل عام طور پر استعمال ہونے والا اشتہاربینٹ ہے ، جو متعدد نامیاتی مادے کی علیحدگی کے لئے موزوں ہے۔ سلیکون کالموں میں عمدہ تھرمل اور کیمیائی استحکام ہوتا ہے اور اسے وسیع پییچ رینج پر استعمال کیا جاسکتا ہے۔

2) ایلومینا کالم: ایلومینا کالم کو تیزابیت ، الکلائن اور غیر جانبدار ایلومینا کالم میں تیزاب اور الکالی کے مطابق تقسیم کیا گیا ہے ، جو مختلف قسم کے کمپاؤنڈ علیحدگی کے لئے موزوں ہے۔ الومینا کالم میں قطبی مادوں کے لئے مضبوط جذب کی صلاحیت ہے۔

3) پولیمائڈ کالم: پولیمائڈ کالم میں جذب کرومیٹوگرافی اور پارٹیشن کرومیٹوگرافی کا فنکشن ہوتا ہے ، اور یہ مرکبات کی علیحدگی کے لئے موزوں ہے جو پولیمائڈ کے ساتھ ہائیڈروجن بانڈ تشکیل دے سکتا ہے ، جیسے فینولز ، ایسڈ ، کوئونز ، وغیرہ۔

shape شکل اور سائز کے لحاظ سے ترتیب دیں

1) گلاس کالم: شفافیت اور آسان مشاہدے کے فوائد کے ساتھ ، لیبارٹریوں میں عام طور پر استعمال ہونے والے کرومیٹوگرافک کالم کی قسم۔ شیشے کے کالم کی جسامت کا تعین مواد کی مقدار کو الگ کرنے اور علیحدگی کی دشواری کی ڈگری کے مطابق کیا جاتا ہے ، اور اونچائی کا تناسب قطر عام طور پر 1: 8 اور 1:50 کے درمیان ہوتا ہے۔

2) سٹینلیس سٹیل کالم: سٹینلیس سٹیل کالم میں سنکنرن مزاحمت اور دباؤ کی مزاحمت کے فوائد ہیں ، جو ہائی پریشر کرومیٹوگرافی کے نظام کے لئے موزوں ہے۔ سٹینلیس سٹیل کالموں کا استعمال نسبتا rare نایاب ہے ، لیکن اس کے کچھ شرائط میں فوائد ہیں۔

موثر علیحدگی کے حصول کے لئے ایک مناسب کرومیٹوگرافک کالم کا انتخاب بہت ضروری ہے۔ کرومیٹوگرافک کالموں کا انتخاب کرتے وقت ، مندرجہ ذیل عوامل پر غور کرنے کی ضرورت ہے:

لیبارٹری کرومیٹوگرافک کالموں میں متعدد شعبوں میں ایپلی کیشنز کی ایک وسیع رینج ہوتی ہے ، بشمول مندرجہ ذیل میں لیکن محدود نہیں:

◆ پروٹین علیحدگی اور طہارت: پروٹین علیحدگی اور طہارت کے لئے کرومیٹوگرافک کالم ایک اہم ٹول ہے۔ پروٹین کے سائز ، چارج پراپرٹی اور وابستگی کے فرق کے مطابق ، علیحدگی اور طہارت کے لئے مختلف کرومیٹوگرافک طریقوں کا انتخاب کیا جاسکتا ہے۔ مثال کے طور پر ، آئن ایکسچینج کالم کرومیٹوگرافی چارج پراپرٹیز کے ذریعہ الگ کردہ پروٹین کے لئے موزوں ہے۔ افیونٹی کالم کرومیٹوگرافی ٹارگٹ پروٹین کو الگ تھلگ اور پاک کرنے کے لئے مخصوص پابند خصوصیات کا استعمال کرتی ہے۔

nucly نیوکلیک ایسڈ کی علیحدگی: کرومیٹوگرافک کالم بھی نیوکلک ایسڈ کی علیحدگی کے لئے استعمال ہوسکتے ہیں۔ مخصوص کرومیٹوگرافک طریقوں کے ذریعے ، مختلف لمبائی اور ڈھانچے (جیسے ڈی این اے کے ٹکڑے اور آر این اے انووں) کے نیوکلیک ایسڈ انووں کو بعد میں نیوکلک ایسڈ تجزیہ ، ترتیب اور دیگر تجربات کی ضروریات کو پورا کرنے کے لئے کالم میں مؤثر طریقے سے الگ کیا جاسکتا ہے۔

small چھوٹے انو مرکبات کی علیحدگی: منشیات کے انٹرمیڈیٹس ، قدرتی مصنوعات میں چھوٹے انو اجزاء وغیرہ ، کرومیٹوگرافک کالموں کی مدد سے الگ ہوسکتے ہیں۔ فکسڈ مرحلے اور موبائل مرحلے کے مابین پارٹیشن گتانک کے فرق کے مطابق ، چھوٹے انو مرکبات کو علیحدگی اور طہارت کے لئے مناسب کرومیٹوگرافک طریقہ کا انتخاب کیا جاسکتا ہے۔ مثال کے طور پر ، الٹ فیز سلکا جیل لیپوفیلک چھوٹے انووں کی علیحدگی کے لئے موزوں ہے۔ عام سلکا جیل ہائیڈرو فیلک چھوٹے انووں کی علیحدگی کے لئے موزوں ہے۔

polys پولیسیچرائڈس کی جزوی علیحدگی: کرومیٹوگرافک کالم کو پولیسیچرائڈس کی جزوی علیحدگی کے لئے استعمال کیا جاسکتا ہے۔ پولیسیچرائڈ انووں اور شاخوں والی چین کے ڈھانچے کے سائز کے مطابق ، پولساکرائڈ مرکب کو مختلف سطحوں میں الگ کرنے کے لئے مناسب کرومیٹوگرافک تکنیکوں کا انتخاب کیا جاسکتا ہے ، جو پولیساکرائڈس کے ڈھانچے اور فنکشن کے مابین تعلقات کا مزید مطالعہ کرنے میں مددگار ہے۔

◆ دوسری درخواستیں: کرومیٹوگرافک کالم سیل ٹوٹ جانے کے بعد انٹرا سیلولر مصنوعات کی علیحدگی اور نکالنے ، پودوں کے نچوڑوں میں فعال اجزاء کی علیحدگی اور طہارت ، اینٹی بائیوٹکس کی علیحدگی اور طہارت ، خامروں کی علیحدگی اور طہارت ، اینٹی باڈیز کی طہارت ، اور وائرس کی علیحدگی اور ارتکاز میں بھی بڑے پیمانے پر استعمال ہوتے ہیں۔ اس کے علاوہ ، کرومیٹوگرافک کالم پیٹروکیمیکل مصنوعات کی علیحدگی اور تجزیہ ، کھانے کی اضافی چیزوں کی علیحدگی اور پتہ لگانے ، کاسمیٹک خام مال کی علیحدگی اور طہارت ، پولیمر مواد کی درجہ بندی کا تجزیہ اور قدرتی مصالحوں کی علیحدگی اور طہارت میں بھی ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔