صنعتی کرومیٹوگرافی کالم

ایکindustrialchromatographycاولیومنکیمیائی تجزیہ کے لئے ایک ایسا آلہ استعمال کیا جاتا ہے جو مرکب میں مرکبات کو الگ کرتا ہے اور ہر مرکب کی مقدار . کی پیمائش کرتا ہے} یہ پیٹرو کیمیکل ، دواسازی ، کھانے کی صنعت ، ماحولیاتی تحفظ اور دیگر شعبوں میں علیحدگی ، طہارت اور پتہ لگانے کے لئے دوسرے شعبوں میں بڑے پیمانے پر استعمال ہوتا ہے۔ کرومیٹوگرافک تجزیہ میں ایک اسٹیشنری مرحلے اور ایک موبائل مرحلے . پر مشتمل ہے ، نمونہ ایک کالم کے ذریعے منظور کیا جاتا ہے ، جہاں مقررہ مرحلے اور موبائل مرحلے کی خصوصیات مختلف مرکبات کو مختلف نرخوں پر کالم سے گزرنے کی اجازت دیتی ہیں ، اس طرح علیحدگی کو حاصل کرنے کے بعد . ان مرکبات کا پتہ لگایا جاسکتا ہے اور اس کے بعد ان مرکبات کا پتہ لگایا جاسکتا ہے اور اس کے بعد ان مرکبات کا پتہ لگایا جاسکتا ہے اور اس کے بعد ان مرکبات کا پتہ لگایا جاسکتا ہے۔

کالم کے علیحدگی کا اثر منتخب کردہ اسٹیشنری مرحلے پر منحصر ہے ، اسی طرح کالم . تقسیم کے کالموں کے لئے عام پیکنگ مواد کی تیاری اور آپریٹنگ شرائط میں کاربن آکٹین ​​کالم (ODS/C18) ، کاربن آکٹین ​​کالم (MOS/C8) ، کاربن ہیکسائل/C6 ، کاربن کوآرٹری کالم (Butyl/C4) شامل ہیں۔ کیٹیشن ایکسچینج کالم (ایس سی ایکس) ، فینیل کالم (فینیل) ، امینو کالم (ا) منو/این ایچ 2) ، سیانو/سی این/نائٹریل ، وغیرہ .

صنعتی کرومیٹوگرافی کالموں میں متعدد شعبوں میں وسیع پیمانے پر ایپلی کیشنز ہیں ، جن میں:

بائیوفرماسٹیکل:کرومیٹوگرافک کالم بائیوفرماسٹیکل کی علیحدگی اور طہارت کا بنیادی ذریعہ ہے ، جو اعلی طہارت اور اعلی سرگرمی حیاتیاتی مصنوعات کی تیاری کے لئے استعمال ہوتا ہے .
کھانے کی حفاظت:کھانے کی حفاظت . کو یقینی بنانے کے ل food کھانے میں اضافی اور اوشیشوں جیسے نقصان دہ مادوں کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے
ماحولیاتی نگرانی:ماحولیاتی معیار کے ماحول میں آلودگی اور تجزیہ اور تجزیہ ماحولیاتی معیار .
پیٹروکیمیکل:پیٹرولیم مصنوعات ، ناپاک تجزیہ وغیرہ کی طہارت کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے .

صنعتی تجزیہ ، ماحولیاتی نگرانی ، منشیات کی تحقیق اور ترقی جیسے بہت سے شعبوں میں ، کرومیٹوگرافک کالم ایک اہم علیحدگی کا ایک آلہ ہے ، اور اس کی کارکردگی تجزیاتی نتائج کی درستگی اور وشوسنییتا کو براہ راست متاثر کرتی ہے . کالم کی کارکردگی کا انحصار اس کے فلرز کی قسم اور خصوصیات پر زیادہ تر ہے۔ کرومیٹوگرافک کالم ، متعلقہ شعبوں میں محققین کے لئے مفید حوالہ فراہم کرنے کے لئے .

کالم پیکنگ کی قسم

کالم فلرز کا انتخاب وسیع ہے ، اور مختلف بنیادی مواد کے مطابق ، اسے غیر نامیاتی فلرز ، نامیاتی فلرز اور حیاتیاتی فلرز میں تقسیم کیا جاسکتا ہے . ہر فلر کی اپنی الگ جسمانی اور کیمیائی خصوصیات اور اطلاق کی گنجائش . ہے۔

غیر نامیاتی فلر

غیر نامیاتی فلرز ان کے اعلی مکینیکل استحکام ، اعلی درجہ حرارت کی استحکام اور تیزاب بیس استحکام کے لئے جانا جاتا ہے ، اور علیحدگی کے زیادہ مطالبہ کے ل suitable موزوں ہیں . عام غیر نامیاتی فلرز میں سلکا جیل ، ایلومینا ، گرافٹائزڈ کاربن اور زرکونیا . شامل ہیں۔

سلیکا جیل عام طور پر استعمال ہونے والے غیر نامیاتی فلرز میں سے ایک ہے ، اور اس کی سطح میں قطبی فنکشنل گروپس ہیں جیسے سلیکن ہائیڈروکسل گروپ (سی آئی او ایچ) ، جو عام مرحلے کی کرومیٹوگرافی اور ریورس فیز کرومیٹوگرافی کے لئے موزوں ہے . عام مرحلے میں کرومیٹوگرافی میں ، سلیکا جیل کو اسٹیشنری مرحلے کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے ، اور پولر کمپوننٹس کو اسٹیشنری مرحلے کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے ، اور پولر کمپونینٹ استعمال ہوتے ہیں۔ کرومیٹوگرافی ، سلکا جیل سطح کے بانڈنگ میں فنکشنل گروپس کی نسبتا weak کمزور قطبی حیثیت ہوتی ہے ، جیسے C18 ، C8 ، وغیرہ . ، اس گروپ کی بڑی قطعیت کو پہلے .} سلیکون فلرز میں اچھا کیمیائی اور تھرمل استحکام کے لئے موزوں ہے اور یہ درجہ حرارت کی صورتحال کے لئے موزوں ہے اور درجہ حرارت کی صورتحال کے لئے موزوں ہے۔

ایلومینا بھی ایک قسم کا غیر نامیاتی فلر ہے ، اور اس کے ذرات سخت ہیں اور اسے مستحکم کرومیٹوگرافک کالم بیڈ میں بنایا جاسکتا ہے . ایلومینا فلر 12 تک پی ایچ کے ساتھ موبائل فیز کے لئے موزوں ہے ، لیکن اس کی درخواست کی حد محدود ہے کیونکہ اس کی مضبوط کارروائی کے ساتھ اس کی مضبوط کارروائی .}

گرافٹائزڈ کاربن غیر نامیاتی فلر کی ایک نئی قسم ہے جس کی سطح کسی بھی سطح میں ترمیم کے بغیر برقرار رکھنے کی بنیاد ہے . گرافٹائزڈ کاربن فلرز میں الکیل بانڈڈ سلکا جیل یا غیر محفوظ پولیمر فلرز سے زیادہ مضبوطی برقرار رکھنے کی صلاحیت ہے اور یہ کچھ جغرافیائی اسومر کو الگ کرنے کے ل suitable مناسب ہے ، گرافٹک isomers {{{1} in in in 1}} {{1} in 1}} {{1 {1} in 1} in کسی بھی پییچ اور درجہ حرارت پر استعمال کریں .

زیرکونیا فلر حالیہ برسوں میں مطالعہ کیا گیا ایک نئے غیر نامیاتی فلرز میں سے ایک ہے . یہ ایک تجارتی غیر محفوظ زرکونیا مائکرو اسپیر کالم ہے جس میں صرف . زرکونیا فلر پییچ رینج 1 ~ 14 کے لئے موزوں ہے ، 100 ڈگری تک درجہ حرارت ہے} 5}

 

نامیاتی فلرز

نامیاتی فلرز میں بنیادی طور پر پولیمر فلرز شامل ہیں ، جیسے پولی اسٹیرن ڈیوائنیل بینزین ، پولیمیٹائلپروپیونیٹ اور اسی طرح . اس طرح کے فلرز کو 1 سے 14 کی پییچ رینج میں استعمال کیا جاسکتا ہے اور اس میں ہائڈرو فوبیکیٹی کو مضبوطی کے ل {.} poliations کے لئے پولیمرر فلر بہت مؤثر ہیں جس سے علیحدگی کے لئے بہت مؤثر ہیں۔ پروٹینز . اس کے علاوہ ، نامیاتی فلرز میں اچھا کیمیائی اور تھرمل استحکام ہے اور وہ علیحدگی کے حالات کی ایک وسیع رینج . کے لئے موزوں ہیں۔

 

حیاتیاتی فلرز

حیاتیاتی فلر بنیادی طور پر حیاتیاتی میکروومولیکولس کے تجزیہ کے لئے موزوں ہیں ، جیسے پروٹین یا نیوکلیک ایسڈ . عام حیاتیاتی فلرز میں پولساکرائڈ مشتق اسٹیشنری فیز کالم ، سائکلوڈیکسٹرین کالم اور پروٹین چیرل کالم کا استعمال کرتے ہیں {1. سے علیحدگی اختیار کرتے ہیں۔ بایومولیکولس .

مناسب کالم پیکنگ کا انتخاب کرومیٹوگرافی {{0} of کے علیحدگی کے اثر کو یقینی بنانے کے لئے کلید ہے جب فلرز کو منتخب کرتے وقت ، درج ذیل عوامل پر غور کرنے کی ضرورت ہے:

 علیحدگی کا موڈ

تجزیہ کاروں کی خصوصیات کے مطابق ، مناسب کرومیٹوگرافک علیحدگی کے موڈ کو منتخب کیا گیا ہے . عام کرومیٹوگرافک علیحدگی کے طریقوں میں الٹ فیز کرومیٹوگرافی (آر پی سی) ، عام مرحلے کی کرومیٹوگرافی (HILIC) ، مختلف ایکسچینج کرومیٹوگرافی (IEC) ، وابستگی کرومیٹوگرافی (وابستہ کرومیٹوگرافی (وابستگی) اور جیل پریفینیشن کرومیٹوگرافی (وابستگی) شامل ہیں۔ فلرز کے لئے تقاضے ، جیسے ریورس فیز کرومیٹوگرافی عام طور پر سلکا جیل یا پولیمر پر مبنی غیر قطبی فلرز کا انتخاب کرتی ہے ، جبکہ عام مرحلے کی کرومیٹوگرافی پولر فلرز . کا انتخاب کرتی ہے۔

 فکسڈ مرحلہ اور موبائل مرحلہ

اسٹیشنری مرحلے کا انتخاب پولر مادوں کے لئے قطبی مادوں کے لئے تجزیہ کار {{0} of کے قطبی ، سالماتی سائز اور ساخت پر منحصر ہے ، پولر فلرز کو منتخب کیا جاسکتا ہے ، جیسے سلکا جیل اور ہائیڈرو فیلک کالم فلرز۔ غیر قطبی مادوں کے ل non ، غیر قطبی مادوں کے ل non ، غیر قطبی فلرز کا انتخاب کیا جاسکتا ہے ، جیسے ہائیڈروفوبک کالم فلرز {{3} age ایک ہی وقت میں ، موبائل مرحلے کی قطعیت کو بھی ایک اچھ separated ے مرحلے سے ملنے کی ضرورت ہوتی ہے تاکہ ایک اچھ separation ے سے علیحدگی کا اثر . مثال کے طور پر ، عام مرحلے کی کرومیٹوگرافی میں ، موبائل مرحلے کی پولرائٹی اس سے کم ہونی چاہئے۔ الٹ فیز کرومیٹوگرافی میں ، موبائل مرحلے کی قطعیت مضبوط ہے .

 ذرہ سائز اور یپرچر

فلر کا ذرہ سائز براہ راست کالم کی کارکردگی اور نمونہ لوڈنگ کی صلاحیت کو متاثر کرتا ہے . ٹھیک دانے والے فلرز کالم کی اعلی کارکردگی فراہم کرسکتے ہیں ، لیکن اس سے کمر کے دباؤ میں اضافہ ہوسکتا ہے۔ موٹے دانوں والی پیکنگ نمونے کی بوجھ کے ل beneficial فائدہ مند ہے ، لیکن کالم کی کارکردگی کم . ہے لہذا ، فلرز کے انتخاب کو اصل علیحدگی کی ضروریات کے مطابق متوازن کرنے کی ضرورت ہے . کے علاوہ ، فلر کا تاکنا سائز بھی اس سے متاثر ہوتا ہے کہ اس سے بھی فائدہ اٹھانا پڑتا ہے اور اس سے بھی فائدہ ہوتا ہے کہ بڑے پیمانے پر تندرستی کے وقت اور اس سے الگ ہونے کے لئے یہ بھی متاثر ہوتا ہے چھوٹے تاکنا سائز کے فلرز چھوٹے مالیکیولر مرکبات . کی برقراری کو بہتر بنانے میں مددگار ثابت ہوتے ہیں

 کیمیائی استحکام

منتخب فلر تجزیاتی حالات کے تحت کیمیائی طور پر مستحکم ہونا چاہئے اور نمونہ یا موبائل مرحلے کے ساتھ رد عمل ظاہر نہیں کرنا چاہئے . یہ کرومیٹوگرافک علیحدگی کے اثر کی درستگی اور وشوسنییتا کو یقینی بنانے کی بنیاد ہے {{1} اعلی درجہ حرارت ، اعلی پریشر یا مضبوط تیزاب اور الکلی حالات کے ساتھ علیحدگی کے لئے اعلی کیمیائی استحکام کے ساتھ انتخاب کرنا ضروری ہے۔

 برانڈ اور لاگت

کالم فلرز کے مختلف برانڈز کارکردگی میں مختلف ہوسکتے ہیں ، لیکن لاگت کے عوامل . پر بھی غور کرنے کی ضرورت ہے جب فلرز کا انتخاب کرتے وقت ، یہ ضروری ہے کہ لیبارٹری کے حالات اور بجٹ پر جامع طور پر غور کریں اور لاگت سے موثر مصنوعات . کا انتخاب کریں۔

Bi بائیوفرماسٹیکلز میں مونوکلونل اینٹی باڈیز (ایم اے بی ایس) کی طہارت

پس منظر

A global biotech company aimed to scale up the purification of a therapeutic monoclonal antibody (mAb) from a 50 L pilot batch to a 1,000 L commercial batch. The challenge was to maintain >99 ٪ طہارت جبکہ مجموعی تشکیل اور میزبان سیل پروٹین (HCP) آلودگی کو کم سے کم کرتے ہوئے .

طریقہ کار

کالم ڈیزائن:

ایک 300 ملی میٹر داخلی قطر (ID) × 500 ملی میٹر سٹینلیس سٹیل کالم پروٹین سے بھرا ہوا ایک وابستگی رال (MabSelect یقینی ، سائٹوا) .

زیادہ سے زیادہ آپریٹنگ پریشر: 3 بار .

عمل پیرامیٹرز:

بائنڈنگ بفر: 20 ملی میٹر سوڈیم فاسفیٹ ، پی ایچ 7.4.

الیوشن بفر: 0.1 ایم سائٹرک ایسڈ ، پی ایچ 3.0.

بہاؤ کی شرح: 150 ملی لیٹر/منٹ (لکیری رفتار: 100 سینٹی میٹر/گھنٹہ) .

آٹومیشن:

پییچ ، چالکتا ، اور یووی کا پتہ لگانے کے لئے انٹیگریٹڈ سنگل استعمال سینسر (280 این ایم) .

0 . 5 m naoh کے ساتھ خودکار صفائی ستھرائی (CIP)۔

نتائج

پیداوار: 85 ٪ (1،200 جی خام فیڈ سے 1،020 جی ایم اے بی) .

طہارت: 99 . 5 ٪ (HPLC تجزیہ)۔

مجموعی مواد:<1% (size-exclusion chromatography, SEC).

ایچ سی پی میں کمی: 50 سے ، 000 پی پی ایم سے<5 ppm (ELISA assay).

کلیدی راستہ

اسکیل ایبلٹی: 1 . 67 کے کالم کا L/D تناسب (لمبائی سے قطر) 67 نے ترازو میں مستقل کارکردگی کو یقینی بنایا۔

رال لائف سائیکل: پروٹین اے رال سی آئی پی کے ساتھ 100 سائیکلوں سے بچ گیا ، جس سے فی بیچ کے اخراجات 30 ٪ . کم ہوگئے

آٹومیشن: ریئل ٹائم مانیٹرنگ نے دستی مداخلت کو 70 ٪ تک کم کیا ، عمل کی وشوسنییتا کو بہتر بناتے ہوئے .

عملی ایپلی کیشنز میں ، مناسب کالم پیکنگ کے انتخاب کے بعد ، کرومیٹوگرافک علیحدگی کے اثر کو یقینی بنانے کے لئے درج ذیل نکات پر توجہ دینے کی ضرورت ہے:

 مصدقہ کالم انسٹرکشن دستی پڑھیں

نیا کالم استعمال کرنے سے پہلے ، آپ کو فلر کی نوعیت ، استعمال اور بحالی کے طریقوں .}}}}} کو سمجھنے کے لئے اس کی ہدایات کو احتیاط سے پڑھنا چاہئے۔

 ایک اچھی طرح سے بھرا ہوا کالم استعمال کریں

اس بات کو یقینی بنائیں کہ کالم اچھی طرح سے بھرا ہوا ہے ، کوئی بلبلز ، کوئی دراڑیں اور دیگر نقائص . اس سے کرومیٹوگرافک علیحدگی کے اثر کی مستقل مزاجی اور درستگی کو یقینی بنانے میں مدد ملتی ہے .

 تناؤ کے اتار چڑھاو کو کم سے کم کریں

کرومیٹوگرافک علیحدگی کے عمل میں ، مکینیکل اور تھرمل جھٹکے سے بچنے کے لئے دباؤ کے اتار چڑھاو کو کم سے کم کیا جانا چاہئے . اس سے کالم فلرز کی حفاظت اور ان کی خدمت کی زندگی کو بڑھانے میں مدد ملتی ہے .

 حفاظتی کالم اور ان لائن فلٹرز کا استعمال کریں

کالم فلرز کو آلودگی اور نقصان سے بچانے کے لئے ، حفاظتی کالم اور ان لائن فلٹرز کو . استعمال کیا جاسکتا ہے اس سے نمونے اور موبائل فیز . میں ناپاک ذرات اور مضبوطی سے برقرار رکھنے والے اجزاء کو فلٹر کرنے میں مدد ملتی ہے۔

 مضبوط سالوینٹ کے ساتھ کالم کثرت سے دھوئے

ایک مضبوط سالوینٹ کے ساتھ کالم کی باقاعدگی سے فلشنگ فلر کی سطح پر باقی نجاستوں اور آلودگیوں کو دور کرسکتی ہے اور اس کی اچھی علیحدگی کی کارکردگی . کو برقرار رکھ سکتی ہے۔

 نمونہ اور موبائل مرحلے کو مکمل طور پر فلٹر کریں

کالم میں نمونے اور موبائل مرحلے کو انجیکشن لگانے سے پہلے ، ناپاک ذرات . کو دور کرنے کے لئے اسے مکمل طور پر فلٹر کیا جانا چاہئے۔

 کالم درجہ حرارت کو کنٹرول کریں

کالم کے استعمال کے درجہ حرارت کا اس کے علیحدگی کے اثر . پر عام حالات کے تحت ، کالم کا درجہ حرارت 40 ڈگری سے کم ہونا چاہئے . سلکا جیل میٹرکس کے کالموں کے لئے ، موبائل مرحلے کی پییچ ویلیو کو 3 {{5} 0 اور 8.0 کے درمیان برقرار رکھنا چاہئے تاکہ فلر کو پہنچنے والے نقصان سے بچا جاسکے۔

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: صنعتی کرومیٹوگرافی کالم ، چین صنعتی کرومیٹوگرافی کالم مینوفیکچررز ، سپلائرز ، فیکٹری