روایتی کالم کرومیٹوگرافی

تیاری کا کام اچھی طرح سے کیا جانا چاہئے:
کالم کا انتخاب کرتے وقت ، مشاہدہ کریں کہ آیا کوئی سینڈنگ بورڈ ہے یا نہیں۔ بورڈ کے بغیر کالموں کے لئے ، کچھ روئی سے نیچے کو بھرنا یاد رکھیں۔ جب تک یہ سلیکون کو آنے سے روک سکتا ہے ، اس وقت تک روئی زیادہ موٹی یا زیادہ پتلی نہیں ہونی چاہئے۔ (بلاگر نے براہ راست کپڑے ہینگر کو ختم کردیا اور اسے پلگ پر دکان میں کپاس داخل کرنے کے لئے استعمال کیا)
کم سے کم پولریٹی ایلوینٹ ، یووی لیمپ (لیبارٹری اہلکاروں کے لئے تجویز کردہ ، ہینڈ ہیلڈ ، کسی بھی وقت تصویر لینے کے لئے تیار) ، دباؤ کا سامان ، اور ٹیسٹ ٹیوب ریک کو ضروری طور پر تیار کریں!

ایک مناسب کالم منتخب کریں ، سلیکون جیل شامل کریں ، سلیکون جیل کو بھگائیں ، اور اسے چپٹا کریں
کا انتخابروایتی کالم کرومیٹوگرافیبہت اہم ہے ، اور ان کے سائز کا حساب کتاب کی مقدار کی بنیاد پر کیا جانا چاہئے ، جس میں عام طور پر تقسیم کیا جاسکتا ہے:

لیبارٹری میں اونچائی کے کالم قطر کا سب سے عام تناسب عام طور پر 1: 2.5 اور 1:15 کے درمیان ہوتا ہے۔ نمونہ لوڈنگ کے دوران اسٹیشنری مرحلے کے طور پر استعمال ہونے والی سلکا جیل کی مقدار نمونے سے تقریبا 20 20 سے 40 گنا ہے۔ کالموں کو منتخب کرنے کا معیار آپ کے نمونے کی TLC پلیٹ چڑھنے کی صورتحال پر مبنی ہونا چاہئے۔ اگر قریبی قربت میں بہت ساری نجاست موجود ہیں تو ، زیادہ سے زیادہ بڑے کالم کا انتخاب کرنے کی کوشش کریں ، تاکہ آپ کے نمونے کو ایک چھوٹی سی پتلی پرت (5 ملی میٹر کے نیچے تجویز کردہ موٹائی) سے ڈھانپ سکے۔ اگر نجاست بہت دور ہے تو ، اس موٹائی کو قدرتی طور پر بڑھایا جاسکتا ہے ، لیکن اس کی سفارش نہیں کی جاتی ہے کہ آپ کے نمونے کی موٹائی 2 سینٹی میٹر سے تجاوز کرے ، جب تک کہ مصنوع کو نہ دھویا جائے۔

بہت سے لوگ یہ سوچنے میں غلطی کرتے ہیں کہ مزید سلیکون کا اضافہ کرنا ، چاہے یہ میرے نمونے پر گاڑھا ہو ، کیا اسے اچھی طرح سے الگ کیا جاسکتا ہے؟ یہ جواب منفی ہے!
اس کی وجہ یہ ہے کہ ان لوگوں نے کبھی نہیں سوچا تھا کہ نیچے اور اس سے اوپر کے نمونے ایک ہی لائن پر نہیں چل رہے ہیں ، لہذا وہ صرف کچھ خالص افراد حاصل کرسکتے ہیں ، جن میں سے بیشتر کو عبور کیا گیا تھا ، ناپاک افراد کا ذکر نہیں کرنا ، وقت اور سالوینٹس کو ضائع کرنا!

اسی وجہ سے نمونے کو پتلا کرنے کی ضرورت ہوتی ہے!

کالم کو منتخب کرنے کے بعد ، سلیکون کو شامل کرنے سے کھانا کھلانے کی چمنی کے ذریعے کیا جاسکتا ہے۔ ایک ہی وقت میں ، ماسک پہننا یقینی بنائیں اور دھوئیں کے ہڈ میں کام کریں۔ اس کی وجہ بلاگر (سلیکوسس) کے ذریعہ وضاحت نہیں کی جائے گی۔
جہاں تک سلکا جیل کی دراندازی کی بات ہے ، تجویز کردہ عمل یہ ہے کہ: سب سے پہلے ، سلکا جیل کے کالم کو عمودی طور پر نصب سلیکا جیل کے ساتھ رکھیں ، سلکا جیل کی سطح کو اپنے ہاتھ سے چپٹا کریں ، سلکا جیل کالم کے نیچے پانی کے پمپ سے مربوط کریں ، سلکا جیل کو پمپ کریں ، اور پھر کم سے کم پولر ایلوینٹ میں ڈالیں۔ جب ایلوینٹ لیک ہونے والا ہے تو ، سالوینٹس کو واٹر پمپ میں پمپ ہونے سے روکنے کے لئے شٹ آف والو کو بند کردیں۔
اس کے بعد ، دباؤ میں ، سلیکون جیل کو ترقی پذیر ایجنٹ کی سب سے چھوٹی مقدار کے ساتھ سات یا آٹھ کالم جلدوں کو فلش کرکے یکساں طور پر بھگا دیا جاسکتا ہے۔

اوپر نمونہ

اینہائڈروس سوڈیم سلفیٹ یا کوارٹج ریت شامل کریں
ایلوینٹ کے اضافے کے دوران نمونے کی پرت کو متاثر کرنے سے بچنے کے ل ، ، عدم مساوات ، اخترتی ، اور علیحدگی کی کارکردگی کو متاثر کرنے کا سبب بنتا ہے ، اینہائڈروس سوڈیم سلفیٹ یا کوارٹج ریت کی ایک پرت عام طور پر نمونے کی پرت کے اوپر رکھی جاتی ہے۔
ہمارے انجینئر ذاتی طور پر انہائیڈروس سوڈیم سلفیٹ رکھنا پسند کرتے ہیں کیونکہ اس میں خشک ہونے والی تقریب بھی ہوتی ہے اور وہ ڈیکلورومیٹین جیسے سالوینٹس کے لئے دوستانہ ہے ، جو اتار چڑھاؤ ، حرارت جذب اور گاڑھاپن کا شکار ہیں!

تدریجی افادیت ، نمونے لینے اور جمع کرنا
لوڈنگ کے بعد ، پہلے کالم کو ایک چھوٹے قطبی سالوینٹ (ایک سالوینٹ کے ساتھ کللا کریں جو مصنوع کو گزرنے کی اجازت نہیں دے گا) 2-3 کالم جلدوں کے لئے (ایک کالم حجم موبائل فیز کے حجم کے حجم کے طور پر بیان کیا گیا ہے) یکسانیت کو یقینی بنانے کے ل. ، اور پھر افادیت کے لئے ایک تناسب کا انتخاب کریں۔

کالم سے گزرنے والے اشرافیہ کا انتخاب کیسے کریں؟
جب آپ کی مصنوعات TLC پلیٹ پر 0. 2 کی RF قیمت تک پہنچ جاتی ہے تو ایلوینٹ کا تناسب تناسب ہے۔
یہ کالم دھونے کا تجربہ ہے کہ میں نے بہت سی کتابیں پڑھی ہیں اور مشترکہ ہیں ، اور اصل عمل بھی بہت مماثل ہے۔ ذاتی طور پر ، میں میلان کو دو بار کم کرنے کو ترجیح دیتا ہوں۔
مثال کے طور پر ، اگر ٹی ایل سی پلیٹ پر چڑھنے کے لئے سالوینٹ PE/EA =2: 1 ہے تو ، بلاگر PE/EA =4: 1 سے تدریجی الیوشن شروع کرنے کا زیادہ امکان ہے اور PE/EA =2: 1 پر اختتام پذیر ہوتا ہے ، عام طور پر اس کے بہتر نتائج برآمد ہوتے ہیں۔

ایلوینٹ جمع کرتے وقت تکنیک بھی موجود ہیں۔ آپ پہلے اسے حاصل کرنے کے لئے ایک بڑے ٹیسٹ ٹیوب کا انتخاب کرسکتے ہیں ، اور جب ٹی ایل سی ٹارگٹ پوائنٹ کے قریب پہنچ رہا ہے تو ، چھوٹے ٹیسٹ ٹیوب پر سوئچ کریں۔ اس سے زیادہ وصول کرنے اور نجاست سے بچنے کے امکان کو کم کیا جاسکتا ہے۔

اگر آپ کو ایسے حالات کا سامنا کرنا پڑتا ہے جہاں ناپاک پوائنٹس اور پروڈکٹ پوائنٹس ایک دوسرے کے قریب ہوتے ہیں ، خاص طور پر وہ لوگ جو کمزور فلوروسینس کے ساتھ ہیں ، دباؤ کا اطلاق نہ کرنا یاد رکھیں۔ اس کے بجائے ، عام دباؤ کے تحت کالم کو پاس کرنے کا انتخاب کریں ، اور ہر بار ٹیوب کو تبدیل کریں جب آدھے یا اس سے کم نلیاں منسلک ہوں ، جس سے طہارت کے امکان میں بھی اضافہ ہوسکتا ہے۔

یاد رکھیں کہ ستون کو بروقت نہ سنبھالیں!
بہت سے لوگوں کو یہ سمجھنے کی عادت ہے کہ کالم گزر گیا ہے اور خشک ہوچکا ہے جب بعد کے مرحلے میں ٹی ایل سی کے بعد ایک یا دو ٹیوبوں میں کوئی پروڈکٹ موجود نہیں ہے۔
مجھے صرف یہ احساس ہوا کہ جب میں نے اس کا حساب لگایا تو پیداوار بہت کم ہے ، یا جب میں سپیکٹرم بنانے گیا تھا ، تو میں نے محسوس کیا کہ سپیکٹرم غلط تھا اور غلط نقطہ سے محروم تھا۔ مجھے اس پر دل کی گہرائیوں سے افسوس ہوا۔
لہذا یہ تجویز کی جاتی ہے کہ آپ مطلوبہ نقطہ کو مکمل کرنے کے بعد کالم پر کارروائی کرنے میں جلدی نہ کریں۔ اس کے بجائے ، پروسیسنگ سے پہلے پیداوار سے ملنے کے لئے جوہری مقناطیسی گونج انجام دیں۔
اگر آپ مصروف ہیں یا اس کے ساتھ دوسرے مرکبات کو پاک کرنے میں جلدی میں ہیںروایتی کالم کرومیٹوگرافی، یہ سفارش کی جاتی ہے کہ ایک اعلی قطبی سومی مخلوط سالوینٹ کے ساتھ کللا کریں اور شناخت کے نتائج کے ل the ایلیوینٹ کے اس حصے کو الگ سے چھوڑ دیں۔